หน้าหลัก > ข่าว > เนื้อหา

การออกแบบห้องปฏิบัติการ PCR คืออะไร

Aug 03, 2020

หัวใจหลักของการออกแบบห้องปฏิบัติการ PCR:


1, รูปแบบห้องปฏิบัติการ PCR

ห้องปฏิบัติการทดสอบการขยาย PCR แบ่งออกเป็นสามพื้นที่การทำงานโดยหลักการ: พื้นที่จัดเก็บและเตรียมน้ำยา, พื้นที่เตรียมชิ้นงาน, การขยายและพื้นที่วิเคราะห์ผลิตภัณฑ์ขยาย เพื่อหลีกเลี่ยงการปนเปื้อนข้ามการเข้าสู่พื้นที่ทำงานแต่ละแห่งต้องปฏิบัติตามทิศทางเดียวอย่างเคร่งครัดนั่นคือจากพื้นที่จัดเก็บและเตรียมน้ำยาเท่านั้น→พื้นที่เตรียมชิ้นงาน→พื้นที่วิเคราะห์ผลิตภัณฑ์ขยายและขยาย การถ่ายโอนรีเอเจนต์และตัวอย่างระหว่างแต่ละพื้นที่ทดลองควรดำเนินการผ่านหน้าต่างการถ่ายโอน



2. การออกแบบระบบปรับอากาศและระบายอากาศในห้องปฏิบัติการและการควบคุมความดัน

ห้องปฏิบัติการ PCR ไม่มีข้อกำหนดระดับการทำให้บริสุทธิ์ที่เข้มงวด แต่เพื่อหลีกเลี่ยงความเป็นไปได้ที่จะเกิดการปนเปื้อนข้ามระหว่างพื้นที่ทดลองต่างๆขอแนะนำให้ใช้แบบฟอร์มการจัดส่งแบบเต็มรูปแบบและแบบฟอร์มการจัดระเบียบอากาศเสียทั้งหมด ในขณะเดียวกันอัตราส่วนของการจ่ายอากาศและไอเสียจะต้องได้รับการควบคุมอย่างเคร่งครัดเพื่อให้แน่ใจว่าข้อกำหนดความดันของแต่ละพื้นที่ทดลอง


微信图片_20200701162204

(1) พื้นที่จัดเก็บและเตรียมน้ำยา

การดำเนินงานหลักในพื้นที่ทดลองนี้ ได้แก่ การเตรียมรีเอเจนต์จัดเก็บการจ่ายรีเอเจนต์และการเตรียมส่วนผสมหลักของปฏิกิริยา น้ำยาและวัสดุที่ใช้ในการเตรียมตัวอย่างควรขนส่งไปยังพื้นที่นี้โดยตรงและไม่ต้องผ่านพื้นที่อื่น วัตถุดิบของรีเอเจนต์จะต้องถูกเก็บไว้ในโซนนี้และเตรียมลงในรีเอเจนต์จัดเก็บที่จำเป็นในโซนนี้ สำหรับการควบคุมความดันการไหลของอากาศบริเวณนี้ควรรักษาความดันด้านนอกไว้เล็กน้อย



(2) พื้นที่เตรียมชิ้นงาน

การดำเนินการหลักในพื้นที่นี้ ได้แก่ การเก็บรักษาตัวอย่างการสกัดกรดนิวคลีอิก (RNA, DNA) การจัดเก็บและการเพิ่มลงในหลอดปฏิกิริยาการขยายและการวัดการสังเคราะห์ดีเอ็นเอ การไล่ระดับความดันในบริเวณนี้จำเป็นต้องเป็นความดันบวกที่สัมพันธ์กับพื้นที่ข้างเคียงเพื่อหลีกเลี่ยงมลพิษละอองลอยเข้าสู่พื้นที่จากบริเวณข้างเคียง นอกจากนี้เนื่องจากการปนเปื้อนที่เกิดจากละอองลอยอาจเกิดขึ้นระหว่างการดำเนินการโหลดตัวอย่างจึงควรหลีกเลี่ยงการเดินในบริเวณนี้โดยไม่จำเป็น


(3) พื้นที่วิเคราะห์ผลิตภัณฑ์การขยายและการขยายสัญญาณ

การดำเนินการหลักในพื้นที่นี้คือการขยายดีเอ็นเอและการกำหนดชิ้นส่วนขยาย นอกจากนี้ยังสามารถเพิ่มเทมเพลตดีเอ็นเอที่เตรียมไว้ (จากพื้นที่เตรียมตัวอย่าง) และการเตรียมส่วนผสมของปฏิกิริยาหลัก (จากพื้นที่จัดเก็บและเตรียมรีเอเจนต์) ลงในส่วนผสมของปฏิกิริยาในบริเวณนี้ ข้อกำหนดการไล่ระดับความดันในพื้นที่นี้ ได้แก่ ความดันเชิงลบที่สัมพันธ์กับพื้นที่ข้างเคียงเพื่อหลีกเลี่ยงการรั่วไหลของละอองลอยจากบริเวณนี้ เพื่อหลีกเลี่ยงมลพิษที่เกิดจากละอองลอยควรลดการเดินในบริเวณนั้นโดยไม่จำเป็น ควรดำเนินการส่วนบุคคลเช่นการเติมตัวอย่างในม้านั่งที่สะอาดเป็นพิเศษ


3. การป้องกันและควบคุมมลพิษ


ประเด็นหลักของการออกแบบห้องปฏิบัติการ PCR คือวิธีหลีกเลี่ยงการปนเปื้อน ในการทำงานจริงมลพิษประเภทต่อไปนี้มักเกิดขึ้น: การปนเปื้อนของผลิตภัณฑ์ขยายเสียง การปนเปื้อนของดีเอ็นเอจีโนมธรรมชาติ การปนเปื้อนของน้ำยาและการปนเปื้อนระหว่างชิ้นงาน เนื่องจากเมื่อเกิดมลพิษแล้วจะต้องหยุดการทดลองจนกว่าจะพบแหล่งกำเนิดมลพิษและผลการทดลองจะต้องเป็นโมฆะและต้องทำการทดลองซ้ำ ดังนั้นจึงเป็นเรื่องที่ใช้เวลานานและน่าเบื่อในการค้นหาแหล่งกำเนิดมลพิษรอบ ๆ ห้องปฏิบัติการหลังจากเกิดมลพิษขึ้นและสิ้นเปลืองกำลังคนและทรัพยากรวัสดุ ดังนั้นเพื่อหลีกเลี่ยงมลภาวะสิ่งสำคัญอันดับแรกควรเป็นการป้องกันไม่ใช่การกำจัด


(1) การแบ่งพื้นที่ทำงานอย่างเข้มงวด

การจัดพื้นที่ทดลองแต่ละพื้นที่มีความสมเหตุสมผล พื้นที่ทดลองแต่ละแห่งควรมีเครื่องหมายที่ชัดเจน (เช่นบ้านเลขที่ที่สะดุดตาหรือสีพื้นที่แตกต่างกันเป็นต้น) เพื่อหลีกเลี่ยงความสับสนของอุปกรณ์และน้ำยาในพื้นที่ทดลองที่แตกต่างกัน


(2) การตั้งค่าระบบที่เหมาะสม

การตั้งค่าระบบปรับอากาศและระบายอากาศที่เหมาะสมพยายามใช้ระบบการจัดส่งแบบเต็มและระบบปรับอากาศแบบไอเสีย การควบคุมแรงดันลมอย่างเข้มงวดเพื่อให้แน่ใจว่าต้องการความดันที่แตกต่างกันในพื้นที่ทดลองต่างๆ


(3) การทำงานมาตรฐาน

ช่างเทคนิคของห้องปฏิบัติการทดสอบการขยายสัญญาณจะต้องผ่านการฝึกอบรมนอกสถานที่และหลังจากผ่านการรับรองแล้วพวกเขาจะสามารถมีส่วนร่วมในการทดสอบการขยายยีนทางคลินิกได้ ในระหว่างการทดลองผู้ปฏิบัติงานต้องสวมถุงมือและเปลี่ยนบ่อยๆ นอกจากนี้การใช้ฝาปิดแบบใช้แล้วทิ้งในการปฏิบัติงานยังเป็นมาตรการที่มีประสิทธิภาพในการป้องกันมลพิษ การทำความสะอาดเป็นไปอย่างทันท่วงทีและถูกต้อง หลังจากงานทดลองจบลงต้องทำความสะอาดพื้นที่ทันที นอกเหนือจากน้ำยาฆ่าเชื้อโรคทั่วไปในการเช็ดและฆ่าเชื้อบนพื้นผิวหรือการฆ่าเชื้อด้วยการฉายรังสีอัลตราไวโอเลตแล้วอุปกรณ์ทดลองบางอย่างก็ควรจะนึ่งด้วย


(4) การจัดการที่เข้มงวด

ควบคุมบุคลากรที่เข้าและออกจากห้องปฏิบัติการอย่างเคร่งครัด บุคลากรที่ไม่มีส่วนเกี่ยวข้องกับการทดลองจะไม่ได้รับอนุญาตให้เข้าและออกจากห้องปฏิบัติการตามความประสงค์ ถ้าเป็นไปได้ให้ตั้งทางเดินและประตูแยกกันเพื่อเข้าและออกจากพื้นที่ทดลองทั้งหมด ลดการเดินโดยไม่จำเป็นในพื้นที่ทดลองเพื่อลดความเป็นไปได้ของการปนเปื้อนข้าม ผลิตภัณฑ์ขยายเสียงพื้นที่วิเคราะห์เป็นแหล่งที่มาหลักของการปนเปื้อนของผลิตภัณฑ์ขยาย ไม่สามารถทิ้งของเหลวเสียในห้องปฏิบัติการได้ ต้องแช่และฆ่าเชื้อในน้ำยาฆ่าเชื้อและทิ้งให้ห่างจากห้องปฏิบัติการ ควรฆ่าเชื้อวัสดุที่ใช้แล้วทิ้งเช่นเคล็ดลับที่ใช้แล้วด้วย หลังจากแช่และฆ่าเชื้อแล้วให้ทำการรักษาอย่างสม่ำเสมอเช่นการเผา ฯลฯ พื้นที่วิเคราะห์ผลิตภัณฑ์ขยายพันธุ์อาจใช้การกลายพันธุ์ทางพันธุกรรมและสารพิษบางชนิดและควรให้ความสนใจเป็นพิเศษกับการป้องกันความปลอดภัยของเจ้าหน้าที่ทดลอง


(5) สิ่งอำนวยความสะดวกสนับสนุนห้องปฏิบัติการที่สมบูรณ์

สิ่งอำนวยความสะดวกสนับสนุนห้องปฏิบัติการที่สมบูรณ์เป็นสิ่งจำเป็นเพื่อให้แน่ใจว่างานทดลอง ควรติดตั้งอุปกรณ์และเครื่องมือที่เกี่ยวข้องตามเนื้อหาการทดลองที่แตกต่างกันของแต่ละห้องปฏิบัติการเช่นม้านั่งที่สะอาดเป็นพิเศษเครื่องหมุนเหวี่ยงตัวอย่าง ฯลฯ